Вызначэнне ўтрымання шчаўевай кіслаты ў садавіне і гародніне метадам высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі (ВЭЖХ)
1. Прынцып эксперыменту і распрацоўка метаду
Шчаўевая кіслата, як распаўсюджаная арганічная кіслата ў садавіне і гародніне, непасрэдна ўплывае на смак і пажыўную каштоўнасць ежы. У гэтым эксперыменце выкарыстоўваецца высокаэфектыўная вадкасная храматаграфія з адваротнай фазай (RP-HPLC). У кіслых умовах рухомай фазы шчаўевая кіслата аддзяляецца па базавай лініі ад рэчываў, якія перашкаджаюць, з дапамогай храматаграфічнай калонкі C18. Для колькаснага аналізу, заснаванага на характарыстыках УФ-паглынання карбаксільных груп у малекулах шчаўевай кіслаты, выкарыстоўваецца ультрафіялетавы дэтэктар, усталяваны на 210 нм.
2. Стандартная крывая і падрыхтоўка ўзору
Для падрыхтоўкі стандартных раствораў выкарыстоўваецца метад градыентнага развядзення: дакладна ўзважваюць 25,0 мг дыгідрату шчаўевай кіслаты і разводзяць да 25 мл ультрачыстай вадой, каб атрымаць маткавы раствор з канцэнтрацыяй 1 мг/мл. Яго паслядоўна разводзяць серыяй стандартных раствораў з канцэнтрацыяй 50, 100, 200, 400 і 800 мкг/мл, прычым кожную канцэнтрацыю ўводзяць у трох экземплярах.
Для падрыхтоўкі ўзораў выкарыстоўваецца мікрахвалевая экстракцыя: узважваюць 5,00 г гамагенату садавіны/гародніны, дадаюць 10 мл раствора салянай кіслаты з канцэнтрацыяй 0,1 моль/л, апрацоўваюць мікрахвалевай печчу пры тэмпературы 60°C на працягу 10 хвілін, фільтруюць праз мембранны фільтр з памерам пор 0,45 мкм і збіраюць фільтрат для аналізу.
3. Аптымізацыя храматаграфічных умоў
Рухомая фаза ўяўляе сабой сістэму дыгідрафасфатнага буфера калію (pH 2,5) - ацэтанітрылу (95:5) з канцэнтрацыяй 0,01 моль/л, з хуткасцю патоку 0,8 мл/мін і тэмпературай калонкі 35°C. Карэкціроўка прапорцыі ацэтанітрылу паказвае, што калі арганічная фаза перавышае 10%, час утрымання шчаўевай кіслаты скарачаецца да менш чым 3 хвілін, але адбываецца выпадзенне піка. Пры канчатковых аптымізаваных умовах час утрымання шчаўевай кіслаты складае 4,2 хвіліны, што дазваляе дасягаць поўнага аддзялення ад суседніх цытрынавай і яблычнай кіслаты (разрозненне > 1,5).
4. Праверка метаду
Праверка лінейнага дыяпазону паказвае добрую лінейную залежнасць паміж плошчай піка і канцэнтрацыяй у дыяпазоне 10–1000 мкг/мл (R² = 0,9993). Мяжа выяўлення (LOD), вызначаная метадам суадносін сігнал/шум, складае 0,5 мкг/мл. У тэстах на паўтаральнасць RSD для шасці паўторных вызначэнняў аднаго і таго ж узору шпінату складае 1,8%. Эксперыменты з аднаўленнем шыпу на трох узроўнях (80%, 100% і 120%) даюць сярэдняе аднаўленне 98,2%, 102,4% і 97,8% адпаведна, што адпавядае патрабаванням колькаснага аналізу.
5. Аналіз рэальных узораў
Былі пратэставаны шэсць камерцыйна даступных садавіны і гародніны: шпінат (356 ± 12 мг/100 г), салера (215 ± 9 мг/100 г), памідор (18 ± 2 мг/100 г), яблык (6 ± 1 мг/100 г), банан (не выяўлены) і брокалі (89 ± 5 мг/100 г). Параўнанне з нацыянальным стандартным метадам (GB 5009.277-2016) паказвае, што адноснае адхіленне паміж двума метадамі складае менш за 5%, што пацвярджае надзейнасць гэтага метаду. У прыватнасці, метад ВЭЖХ дэманструе больш высокую адчувальнасць, чым традыцыйныя метады тытравання, пры аналізе ўзораў з нізкім утрыманнем.
6. Асноўныя заўвагі
Строга кантралюйце значэнне pH падчас папярэдняй апрацоўкі ўзору. Калі pH экстракта перавышае 3, асаджэнне оксалату кальцыя прывядзе да нізкіх вынікаў тэсту. Рухомую фазу варта рыхтаваць свежую штодня, каб пазбегнуць асаджэння соляў і закаркавання калонкі. Пасля кожных 20 ін'екцый прамывайце калонку ацэтанітрылам і вадой (30:70) на працягу 30 хвілін, каб прадухіліць зніжэнне эфектыўнасці калонкі. Для ўзораў, якія змяшчаюць пігменты (напрыклад, пурпурная капуста), рэкамендуецца дадаць этап ачысткі цвёрдафазнай экстракцыяй перад ін'екцыяй.
7. Інструкцыі па ўжыванні і пашырэнні
Гэты метад можна пашырыць на выяўленне шчаўевай кіслаты ў біялагічных узорах, такіх як мача і кроў. Рэгулюючы склад рухомай фазы (напрыклад, дадаючы гідраксід тэтрабутыламонію), шчаўевую кіслату і яе метабаліты можна вызначаць адначасова. У спалучэнні з мас-спектрометрычным дэтэктарам можна распрацаваць больш дакладны метад выяўлення слядоў. У харчовай прамысловасці гэты метад можа забяспечыць важную падтрымку дадзеных для выбару гатункаў з нізкім утрыманнем шчаўевай кіслаты і аптымізацыі працэсаў прыгатавання ежы.
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. – Шчаўевая кіслата
Кампанія Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. з'яўляецца надзейным пастаўшчыком і экспарцёрам высакаякаснай шчаўевай кіслаты (прамысловага класа, мінімум 99,6%) з правінцыі Шаньдун, Кітай. Наша шчаўевая кіслата — гэта белае крышталічнае цвёрдае рэчыва, таксама вядомае як этандыёвая кіслата, з малекулярнай формулай C₂H₂O₄. Яна мае высокую чысціню, нізкае ўтрыманне прымешак і стабільную якасць ва ўсіх партыях, што адпавядае патрабаванням тэкстыльнай, скураной, металургічнай, рэдказямельнай, хімічнай ачысткі і будаўнічай прамысловасці.
Мы пастаўляем як бязводную, так і дыгідратную шчаўевую кіслату ў мяшках па 25 кг, 50 кг і мяшках па 1000 кг на вагу. Дзякуючы строгім працэдурам кантролю якасці, поўным справаздачам аб выпрабаваннях і гнуткім планам паставак, мы гарантуем стабільныя пастаўкі і стабільную прадукцыйнасць для пакупнікоў па ўсім свеце. Наша прадукцыя шырока экспартуецца ў Паўднёва-Усходнюю Азію, Еўропу, Афрыку і Амерыку, дзе яна атрымлівае прызнанне за надзейную якасць і канкурэнтаздольныя цэны.
Абярыце Zibo Anhao Chemical для надзейнай пастаўкі шчаўевай кіслаты і прафесійнага комплекснага хімічнага абслугоўвання.
Абярыце Zibo Anhao Chemical, каб атрымаць шчаўевую кіслату высокай чысціні, якая забяспечвае стабільную прадукцыйнасць і каштоўнасць для вашага бізнесу. Звяжыцеся з намі для аптовых заказаў або тэхнічных спецыфікацый: info@anhaochemical.com
